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摘自《天然產物研（yán）究與開發》2014年第26期——《N-氨甲酰穀氨酸對斷奶環江香豬腸道微生物（wù）區係的影響》。作者：周笑犁博士。轉載請注明出處。

摘 要

試（shì）驗選用體重為 3.17 ± 0.21 kg 的 21日齡（líng）斷奶環江香豬 12 頭，隨機分為2組（zǔ），每組6頭，分別飼喂添加0.1% NCG日（rì）糧和基礎日糧，試驗期為 14d。試驗結束時，采（cǎi）集回（huí）腸和盲腸內容物，利用 T-RFLP、PCR/ DGGE 和熒光定量 PCR 技術，測定其腸道微生物區係的變（biàn）化。結果表明（míng），與（yǔ）對照（zhào）組相比，NCG組回腸（cháng）內（nèi）容物中微生（shēng）物（wù）的多樣性增加，回腸和（hé）盲腸（cháng）內容物中雙歧杆菌和乳酸杆（gǎn）菌的數量（liàng）顯著增加、大腸埃希（xī）菌的數（shù）量顯著降低（dī） (P＜0.05)，盲腸（cháng）內容物中鏈球菌的（de）數量也顯著（zhe）降（jiàng）低(P＜0.05)。可見，日糧中添加 0.1% NCG 有助於提高斷（duàn）奶環江香豬腸道（dào）內容（róng）物中有益菌的數（shù）量、抑製有害菌的繁殖，從而改善（shàn）腸道微生物區係。

1 前 言

新生仔豬的腸道菌群發育快速（sù）並趨於穩定，但斷奶極易破壞腸（cháng）道微生態平衡（héng），使病原菌大量（liàng）繁殖，引起仔豬（zhū）的（de）腹（fù）瀉、生長不（bú）良、消化功能紊亂和免疫力下（xià）降等。大量研究表明，外源補充精（jīng）氨酸能調節機體氨基酸的（de）吸收和代（dài）謝，並促進其腸道發育和功能，增強腸（cháng）道健康，從而提高機體（tǐ）免疫力，上（shàng）述作用可能與（yǔ）其對腸道微生物的調控有關。N-氨甲酰穀氨酸(NCG)作為尿素循環中（zhōng）鳥氨酸生成瓜氨（ān）酸的中間體N-乙酰穀氨酸的（de）類（lèi）似物（wù），可有效激（jī）活內源性（xìng）精氨酸的合成（chéng），外源添加（jiā）NCG能夠（gòu）發揮（huī）和精氨酸類似的功能，並且極大地降低（dī）成本。本研究（jiū）觀察了日糧中（zhōng）添加NCG對斷奶環江香豬腸道微生物區係的影響，為闡明NCG的（de）促（cù）生長機製（zhì）提供（gòng）依據。

2 材料與方法

  選用體重為3.17±0.21kg的21日齡斷奶環江香豬12頭，隨機（jī）分為2組，每組（zǔ）6頭，單欄飼養。按中國地方豬營養需要量並結合NRC(1998)營養需要量配製本（běn）試驗基礎（chǔ）日糧（liáng）。試（shì）驗（yàn）組在基礎日糧中（zhōng）添加0.1% 的NCG(含量50%)，對照組飼喂基礎（chǔ）日糧。日糧中（zhōng）加入2倍水後，調（diào）成（chéng）粥狀飼喂。每日飼喂4次，自由采食和飲水。預飼3d後，逐頭稱取空腹體重。因斷奶14d後,斷奶應激基本（běn）消失，故本試驗試驗期（qī）為14d。試驗結束時，采集回腸和（hé）盲腸內（nèi）容物，利用分子生物學技術測（cè）定（dìng）其腸道微（wēi）生物區係的變化（huà）。

3 結果與分析 

3.1 NCG對腸道微生物多樣性的影響

由表 2 可見，回（huí）腸和盲腸內（nèi）容物中微生物的TRF 數變化顯著；與對照組（zǔ）相比，0.1% NCG 組回腸內容物微生物（wù）的 TRF 數增加，提示腸道微生物的多樣性提高。

表2 日糧添加NCG對腸道微生物酶切末端限製性片段的影響（%：n=6）

bp	回腸		盲腸
	0.1%NCG組	對照組	0.1%NCG組	對照組
45	1.20	1.17	-	-
61	17.02	-	1.10	1.63
64	37.81	-	33.12	36.5
67	-	-	-	1.50
70	-	1.32	-	1.46
208	-	-	1.34	-
248	17.25	1.03	24.81	5.53
250	-	-	-	1.89
259	1.11	-	-	-
265	12.69	45.85	33.20	17.95
268	-	-	-	2.28
278	-	-	1.11	2.50
308	5.50	1.46	1.83	10.55
316	-	-	1.04	-
321	-	-	1.13	2.52
331	7.42	49.18	1.33	15.68

由圖1可見，NCG組回腸內容物中微生物 16S rRNA 的 DGGE 條（tiáo）帶（dài）數 (14.7 ± 1.6) 較（jiào）對照組（zǔ） (12.2 ± 1.0) 有增（zēng）加趨勢（shì），說明日糧添加NCG可增加試驗豬回腸微生物菌群的多樣性。由圖2可見，對照組和 NCG 組盲（máng）腸內（nèi）容物中（zhōng）微生物區係的相似性（xìng）達 60% 以上。

注：1-6泳道代表NCG組，7-12泳道（dào）代表對（duì）照組，下同（tóng）。

3.2 NCG對腸道部分細菌（jun1）數量的影響

由表3可見（jiàn），飼喂 0.1% NCG 14d後，回腸（cháng）和盲腸內容物（wù）中雙歧杆菌和乳酸杆菌的數量顯著（zhe）增加、大腸埃希菌的數量顯著降低 (P ＜0.05)，盲腸內容物中鏈球菌的數量也顯著降低 (P ＜0.05)。

表3 日糧添加NCG對腸道部分細菌16S rRNA 的影（yǐng）響（n=6）

腸段	項目	0.1%NCG組	對照組
回腸（cháng）	雙歧杆（gǎn）菌（jun1）	1.42±0.15*	1.00±0.12
	乳酸杆菌	1.64±0.17*	1.00±0.13
	鏈球菌	0.82±0.10	1.00±0.15
	大腸埃希菌	0.62±0.12*	1.00±0.16
盲腸	雙歧杆菌	1.93±0.14*	1.00±0.18
	乳酸杆菌	1.54±0.19*	1.00±0.16
	鏈球菌	0.68±0.09*	1.00±0.13
	大腸埃希菌	0.60±0.08*	1.00±0.09

4 結   論 

日糧添加NCG可促（cù）進斷奶環江香豬腸道發育和功能，增強腸道（dào）健康，增加腸道菌群的多樣（yàng）性，抑製大腸埃希（xī）菌、鏈（liàn）球菌等有害菌的繁殖，促進乳酸（suān）杆菌、雙歧（qí）杆菌（jun1）等有益菌的繁殖，有效地緩解仔豬斷奶應激。

參考文獻略。